CRISPR/Cas9基因编辑技术(包含Base editor)专题研讨会(线上)
时间:2021-05-22 08:30 至 2021-05-23 17:00
地点:线上活动

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CRISPR/Cas9基因编辑技术(包含Base editor)专题研讨会(线上) 已截止报名课程时间: 2021-05-22 08:30至 2021-05-23 17:00结束 课程地点: 线上活动 会议规模:50人 主办单位: 上海莫速乎教育投资有限公司
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会议通知
会议内容 主办方介绍
CRISPR/Cas9基因编辑技术(包含Base editor)专题研讨会(线上)宣传图
CRISPR/Cas9基因编辑技术(包含Base editor)专题研讨会
2021年5月22~23日 ???网络精讲班
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??? 基因编辑技术指能够让人类对多个物种内的目标基因进行“精确编辑”,实现对特定DNA片段的删除、插入、定点突变等。与传统的TALEN和ZFN基因编辑技术相比,CRISPR/Cas9技术自问世以来,以其操作的便捷性,高效的基因编辑能力获得青睐,成为当下科研工作者的新宠儿。目前该技术已广泛应用于人、大鼠、小鼠、斑马鱼、果蝇、猪、水稻、小麦和拟南芥等动植物(细胞)以及细菌等微生物的基因组靶向改造,并已在功能基因组研究、疾病防治、动植物育种、动物疾病模型开发、基因治疗等领域展现出巨大的应用前景。
大量从事医学和生命科学的研究者,都将会在自身的研究领域中用到CRISPR/Cas9基因编辑技术,但在实际操作中,由于各种原因常常遭遇技术瓶颈,因而无法顺利地达成实验目标。本次研讨会将深入系统的讲解CRISPR/Cas9基因编辑工具原理,操作流程,理论结合实践,同时讲解实验操作容易遇到的问题及注意事项、解决方法,将让大家详细了解到具体如何利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰动物等。本次学习班将组建微信群与老师深入交流探讨,帮助解决后续实验过程中遇到的技术及理论问题。可提前准备好自己科研中遇到的问题,通过现场及后续的交流探讨,全面掌握CRISPR/Cas9技术应用的方法及技巧,避开科研路上的弯路和陷阱,轻松成为科研达人。
本次研讨会主办单位:
莫速乎科研教育(上海莫速乎教育投资有限公司) 上海荆麦信息科技中心
课程目标:
1、??? 掌握基因打靶与基因编辑技术(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9),能够设计sgRNA靶点,构建CRISPR/Cas9质粒,用于基因敲除和敲入。
2、??? 掌握CRISPR/Cas9质粒转染方法, 阳性细胞克隆筛选方法体系,基因编辑细胞系的建立,基因修饰情况分析方法。
3、??? 掌握CRISPR/Cas9脱靶产生的原因,脱靶检测方法,降低脱靶问题的方法
4、??? 掌握CRISPR/Cas9的实际应用,对构建基因修饰小鼠和基因修饰大动物(猪)有较深入了解。
5、??? 掌握新基因编辑工具,如:Cpf1, C2C2, base editing等。
6、??? 掌握基因编辑研究领域前沿进展,基因编辑工具的拓展应用、临床应用等,形成利用基因编辑工具结合自己研究内容等科学思维。
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莫速乎科研教育,简称莫速乎,原名“多圈课堂”,创立于2012年12月,隶属于上海莫速乎教育投资有限公司。2014年3月更名为“莫速乎科研教育”,品牌名源于我国古代著名教育家《荀子·劝学》“学之经 莫速乎”。莫速乎旨在通过独创的EAT理念打造最易接收并最能提高实际技能的高清视频课程,以作为科研传统教育的补充或替代。同时将持续开展现场研讨班,以弥补视频课程之不足。EAT理念以荀子思想为根基,并从“学”的角度优化教学,且课程策划符合哲学的认识论规律,是目前“最符合人性”的教学理念。在课程策划方面,我们坚信每个小领域只需要一部课程,一部优秀的课程,经典的课程,足可供全国千百万人学习,莫速乎正是立志于打造每个小领域内的这一部课程。
会议日程
(最终日程以会议现场为准)
课程安排:(具体课程进度根据实际反馈情况进行适当调整)
第一天上午8:30-12:00
一、基因编辑技术
1、基因打靶技术
2、细胞基因组DNA的修复机制
3、基因敲除与基因敲入???
4、ZFNs、TALENs技术
二、CRISPR/Cas9基因组编辑技术原理
1、CRISPR/Cas系统
? 1.1、CRISPR/Cas系统的发现
? 1.2、CRISPR/Cas系统的组成
? 1.3、CRISPR/Cas系统的工作原理
2、CRISPR/Cas9技术的发展及其应用
? 2.1 CRISPR/Cas9技术的建立
? 2.2 CRISPR/Cas9技术的应用
? 2.3 CRISPR/Cas9技术的脱靶问题
第一天下午13:30-17:00
三、CRISPR(sgRNA)的设计与制备
1、目标基因结构及功能的生物信息学分析
2、gRNA的设计(在线互动设计演练)
3、sgRNA模板的制备
4、sgRNA表达载体的构建
4.1 sgRNA的体外表达?
4.2 sgRNA在哺乳动物细胞中的表达
5. 以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
四、Cas9的选择与制备
1、Cas9的选择?
? 1.1 Cas9蛋白的结构特点简介???
? 1.2 Cas9的密码子优化???
2、Cas9表达载体的构建
? 2.1 Cas9的体外表达???
? 2.2 Cas9在脊椎动物细胞中的表达
3、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
第二天上午8:30-12:00
五、sgRNA活性验证
1、Indel突变检测的基本策略
2、基于细胞系活性验证方法
? 2.1 PCR产物酶切检测及利用ImageJ软件计算活性。
? 2.2 PCR产物亚克隆测序法
3、基于胚胎的活性验证方法
4、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
六、利用CRISPR/Cas9技术创建基因组编辑人及动物细胞系
1、目标基因的基因组组成分析
2、基因组编辑策略设计
? 2.1基因敲除
? 2.2基因敲入
? 2.3定点突变
? 2.4大片段删除
3、sgRNA的设计与活性验证
4、用于基因敲入的供体DNA的设计
? 4.1 ssODN(单链DNA供体)??
? 4.2 双链DNA供体
5、质粒(和/或供体)导入细胞系的方法(脂质体转染,电转,病毒转导)
6、阳性克隆筛选
? 6.1目标基因组DNA片段的PCR扩增???
? 6.2PCR产物酶切检测
? 6.3PCR产物亚克隆测序
7、基因组编辑细胞系的建立
8、提高基因敲入(同源重组)效率的策略
9、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解
第二天下午13:30-17:00
七、利用CRISPR技术创建基因组编辑动物
1、目标基因的组成分析????????
2、基因组编辑策略的选择
? 2.1基因敲除
? 2.2基因敲入
? 2.3定点突变
? 2.4大片段删除
3、sgRNA的设计与活性验证
4、用于基因敲入的供体DNA的设计
? 4.1 ssODN(单链DNA供体)??
? 4.2 双链DNA供体
5、通过显微注射法向受精卵中导入sgRNA/Cas9 mRNA/供体DNA
6、胚胎中基因编辑效率的检测
? 6.1单细胞PCR扩增
? 6.2 PCR产物测序验证
7、胚胎移植,获得基因编辑个体
8、基因编辑动物F1代的鉴定
9、通过体细胞克隆法获得基因编辑动物
? 9.1供体细胞分离、培养
? 9.2供体细胞的基因编辑
? 9.3体细胞核移植操作
? 9.4胚胎移植
? 9.5基因编辑个体的鉴定和扩繁
八、基因组编辑技术的脱靶问题
1、脱靶的产生原因?????
2、脱靶检测方法??
3、如何解决脱靶问题??
4、脱靶问题对不同领域研究者的意义
九、CRISPRi基因表达抑制技术、CRISPRa基因表达激活技术及Base editing单碱基编辑技术
1、dCas9的特征简介??????
2、运用CRISPR技术调控基因在细胞中表达的基本实验过程
3、CRISPR技术介导的转录抑制(CRISPRi)?
4、CRISPR技术介导的转录活化(CRISPRa)
5、单碱基编辑技术
十、基因组编辑技术的前景展望
1、基因组编辑技术对未来社会的革命性影响
? 1.1 功能基因组研究(功能获得性研究、功能缺失性研究)
? 1.2优良经济性状动植物新品种的选育??
? 1.3人类疾病的动物模型的建立
? 1.4 基因治疗
2、基因组编辑技术的伦理学问题
十一、CRISPR/Cas9基因编辑技术相关论文撰写、基金申请技巧、注意事项详解等
查看更多
会议嘉宾
(最终出席嘉宾以会议现场为准)
主讲专家:
主讲专家来自中国科学院,先后参与并承担973、863、国家自然基金课题及转基因重大专项课题。研究领域为基因组编辑、体细胞核移植、疾病模型的建立以及胚胎发育过程中表观遗传学研究等。有丰富的理论和实际研究经验。学员通过与专家直接交流,能够分享到这些顶尖学术机构的研究经验和实验设计的思路。学员通过集中专题学习后能够扩展思路,在研究技术方面领悟更多。
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参会指南
会议门票
会务信息
时间地点:
2021/5/22-23?? 网络精讲班
3200元/人 ?注册费包含网络直播平台费、专家讲课费及视频课程的费用。注册费用
主办单位:莫速乎教育(上海莫速乎教育投资有限公司)、上海荆麦信息科技中心
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温馨提示
酒店与住宿:
为防止极端情况下活动延期或取消,建议“异地客户”与活动家客服确认参会信息后,再安排出行与住宿。
退款规则:
活动各项资源需提前采购,购票后不支持退款,可以换人参加。
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