参会报名
会议通知
会议日程
会议嘉宾
参会指南
手机下单

首页 > 培训课程 > 学术/科研培训 > CRISPR/Cas9基因编辑技术（包含Base editor）专题研讨会(线上) 更新时间：2021-04-12T15:26:44

收藏3人

分享到

Cas9基因编辑技术（包含Base editor）专题研讨会（线上）

课程时间： 2021-05-22 08:30至 2021-05-23 17:00结束

课程地点：线上活动

会议规模：50人

主办单位：上海莫速乎教育投资有限公司

行业热销热门关注看了又看换一换

会议通知
会议内容主办方介绍

CRISPR/Cas9基因编辑技术（包含Base editor）专题研讨会(线上)宣传图

CRISPR/Cas9 基因编辑技术（包含Base editor）专题研讨会

2021年5月22～23日 ???网络精讲班

??? 基因编辑技术指能够让人类对多个物种内的目标基因进行“精确编辑”，实现对特定DNA片段的删除、插入、定点突变等。与传统的TALEN和ZFN基因编辑技术相比，CRISPR/Cas9技术自问世以来，以其操作的便捷性，高效的基因编辑能力获得青睐，成为当下科研工作者的新宠儿。目前该技术已广泛应用于人、大鼠、小鼠、斑马鱼、果蝇、猪、水稻、小麦和拟南芥等动植物（细胞）以及细菌等微生物的基因组靶向改造，并已在功能基因组研究、疾病防治、动植物育种、动物疾病模型开发、基因治疗等领域展现出巨大的应用前景。

大量从事医学和生命科学的研究者，都将会在自身的研究领域中用到CRISPR/Cas9基因编辑技术，但在实际操作中，由于各种原因常常遭遇技术瓶颈，因而无法顺利地达成实验目标。本次研讨会将深入系统的讲解CRISPR/Cas9基因编辑工具原理，操作流程，理论结合实践，同时讲解实验操作容易遇到的问题及注意事项、解决方法，将让大家详细了解到具体如何利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰动物等。本次学习班将组建微信群与老师深入交流探讨，帮助解决后续实验过程中遇到的技术及理论问题。可提前准备好自己科研中遇到的问题，通过现场及后续的交流探讨，全面掌握CRISPR/Cas9技术应用的方法及技巧，避开科研路上的弯路和陷阱，轻松成为科研达人。

本次研讨会主办单位：

莫速乎科研教育（上海莫速乎教育投资有限公司）上海荆麦信息科技中心

课程目标：

1、??? 掌握基因打靶与基因编辑技术(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9)，能够设计sgRNA靶点，构建CRISPR/Cas9质粒，用于基因敲除和敲入。

2、??? 掌握CRISPR/Cas9质粒转染方法, 阳性细胞克隆筛选方法体系，基因编辑细胞系的建立，基因修饰情况分析方法。

3、??? 掌握CRISPR/Cas9脱靶产生的原因，脱靶检测方法，降低脱靶问题的方法

4、??? 掌握CRISPR/Cas9的实际应用，对构建基因修饰小鼠和基因修饰大动物（猪）有较深入了解。

5、??? 掌握新基因编辑工具，如：Cpf1, C2C2, base editing等。

6、??? 掌握基因编辑研究领域前沿进展，基因编辑工具的拓展应用、临床应用等，形成利用基因编辑工具结合自己研究内容等科学思维。

上海莫速乎教育投资有限公司

莫速乎科研教育，简称莫速乎，原名“多圈课堂”，创立于2012年12月，隶属于上海莫速乎教育投资有限公司。2014年3月更名为“莫速乎科研教育”，品牌名源于我国古代著名教育家《荀子·劝学》“学之经莫速乎”。莫速乎旨在通过独创的EAT理念打造最易接收并最能提高实际技能的高清视频课程，以作为科研传统教育的补充或替代。同时将持续开展现场研讨班，以弥补视频课程之不足。EAT理念以荀子思想为根基，并从“学”的角度优化教学，且课程策划符合哲学的认识论规律，是目前“最符合人性”的教学理念。在课程策划方面，我们坚信每个小领域只需要一部课程，一部优秀的课程，经典的课程，足可供全国千百万人学习，莫速乎正是立志于打造每个小领域内的这一部课程。

会议日程（最终日程以会议现场为准）

课程安排：(具体课程进度根据实际反馈情况进行适当调整)

第一天上午8:30-12:00

一、基因编辑技术

1、基因打靶技术

2、细胞基因组DNA的修复机制

3、基因敲除与基因敲入???

4、ZFNs、TALENs技术

二、CRISPR/Cas9基因组编辑技术原理

1、CRISPR/Cas系统

? 1.1、CRISPR/Cas系统的发现

? 1.2、CRISPR/Cas系统的组成

? 1.3、CRISPR/Cas系统的工作原理

2、CRISPR/Cas9技术的发展及其应用

? 2.1 CRISPR/Cas9技术的建立

? 2.2 CRISPR/Cas9技术的应用

? 2.3 CRISPR/Cas9技术的脱靶问题

第一天下午13:30-17:00

三、CRISPR（sgRNA）的设计与制备

1、目标基因结构及功能的生物信息学分析

2、gRNA的设计（在线互动设计演练）

3、sgRNA模板的制备

4、sgRNA表达载体的构建

4.1 sgRNA的体外表达?

4.2 sgRNA在哺乳动物细胞中的表达

5. 以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解

四、Cas9的选择与制备

1、Cas9的选择?

? 1.1 Cas9蛋白的结构特点简介???

? 1.2 Cas9的密码子优化???

2、Cas9表达载体的构建

? 2.1 Cas9的体外表达???

? 2.2 Cas9在脊椎动物细胞中的表达

3、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解

第二天上午8:30-12:00

五、sgRNA活性验证

1、Indel突变检测的基本策略

2、基于细胞系活性验证方法

? 2.1 PCR产物酶切检测及利用ImageJ软件计算活性。

? 2.2 PCR产物亚克隆测序法

3、基于胚胎的活性验证方法

4、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解

六、利用CRISPR/Cas9技术创建基因组编辑人及动物细胞系

1、目标基因的基因组组成分析

2、基因组编辑策略设计

? 2.1基因敲除

? 2.2基因敲入

? 2.3定点突变

? 2.4大片段删除

3、sgRNA的设计与活性验证

4、用于基因敲入的供体DNA的设计

? 4.1 ssODN（单链DNA供体）??

? 4.2 双链DNA供体

5、质粒（和/或供体）导入细胞系的方法（脂质体转染，电转，病毒转导）

6、阳性克隆筛选

? 6.1目标基因组DNA片段的PCR扩增???

? 6.2PCR产物酶切检测

? 6.3PCR产物亚克隆测序

7、基因组编辑细胞系的建立

8、提高基因敲入（同源重组）效率的策略

9、以上内容相关实验的注意事项、实验技巧、实验结果讲解

第二天下午13:30-17:00

七、利用CRISPR技术创建基因组编辑动物

1、目标基因的组成分析????????

2、基因组编辑策略的选择

? 2.1基因敲除

? 2.2基因敲入

? 2.3定点突变

? 2.4大片段删除

3、sgRNA的设计与活性验证

4、用于基因敲入的供体DNA的设计

? 4.1 ssODN（单链DNA供体）??

? 4.2 双链DNA供体

5、通过显微注射法向受精卵中导入sgRNA/Cas9 mRNA/供体DNA

6、胚胎中基因编辑效率的检测

? 6.1单细胞PCR扩增

? 6.2 PCR产物测序验证

7、胚胎移植，获得基因编辑个体

8、基因编辑动物F1代的鉴定

9、通过体细胞克隆法获得基因编辑动物

? 9.1供体细胞分离、培养

? 9.2供体细胞的基因编辑

? 9.3体细胞核移植操作

? 9.4胚胎移植

? 9.5基因编辑个体的鉴定和扩繁

八、基因组编辑技术的脱靶问题

1、脱靶的产生原因?????

2、脱靶检测方法??

3、如何解决脱靶问题？?

4、脱靶问题对不同领域研究者的意义

九、CRISPRi基因表达抑制技术、CRISPRa基因表达激活技术及Base editing单碱基编辑技术

1、dCas9的特征简介??????

2、运用CRISPR技术调控基因在细胞中表达的基本实验过程

3、CRISPR技术介导的转录抑制（CRISPRi）?

4、CRISPR技术介导的转录活化（CRISPRa）

5、单碱基编辑技术

十、基因组编辑技术的前景展望

1、基因组编辑技术对未来社会的革命性影响

? 1.1 功能基因组研究（功能获得性研究、功能缺失性研究）

? 1.2优良经济性状动植物新品种的选育??

? 1.3人类疾病的动物模型的建立

? 1.4 基因治疗

2、基因组编辑技术的伦理学问题

十一、CRISPR/Cas9基因编辑技术相关论文撰写、基金申请技巧、注意事项详解等

会议嘉宾（最终出席嘉宾以会议现场为准）

主讲专家：

主讲专家来自中国科学院，先后参与并承担973、863、国家自然基金课题及转基因重大专项课题。研究领域为基因组编辑、体细胞核移植、疾病模型的建立以及胚胎发育过程中表观遗传学研究等。有丰富的理论和实际研究经验。学员通过与专家直接交流，能够分享到这些顶尖学术机构的研究经验和实验设计的思路。学员通过集中专题学习后能够扩展思路，在研究技术方面领悟更多。